Metode Penggunaan:
1. Contoh ekstraksi DNA
Direkomendasikan untuk menggunakan ekstraksi asam nukleat virus Kit Shijiazhuang Shengbo
Bioteknologi Co., Ltd. Untuk contoh ekstraksi DNA. Silakan operasikan menurut reagen
petunjuk.
2. Penambahan sampel
Setelah pencairan solusi reaksi qPCR secara alami, ambil 17μ l dari solusi tersebut ke dalam tabung PCR, tambahkan 3
μ l dari asam nukleat yang diekstraksi pada langkah 1, mencakup penutup tabung, campuran, dan sentrifuga.
3. Amplifikasi PCR
3.1 Tempatkan tabung reaksi pada tangki reaksi PCR kuantitatif fluoresens
3.2 Atur contoh nama dan informasi saluran.
4. Analisis hasil
4.1 hasil Analysis condition
Menetapkan baseline dan ambang batas: Umumnya, menganalisis hasil secara langsung sesuai dengan alat berat.
4.2 penghakiman hasil
Lihat hasil subtipe dalam saluran FAM, subtipe dalam saluran HEX (atau
VIC, JOE),dan subtipe H9 pada saluran Cy5.
Positif: Nilai CT saluran deteksi ≤ 37.0, dan kurva mempunyai pertumbuhan eksponensial yang nyata
kurva;
Mencurigakan: Jika nilai CT saluran deteksi berada di antara≤dan 40(37.0< nilai CT 40 37.0)
,
sebaiknya ulangi deteksi. Jika hasil pengujian juga sama, dan kurva memiliki
kurva pertumbuhan yang jelas, hal ini ditentukan sebagai positif, jika tidak maka akan negatif;
Negatif: Tidak ada nilai CT.
5. Batasan metode deteksi
Langkah
Jumlah siklus
Suhu
waktu
Mengumpulkan sinyal
1
1 siklus
90 DERAJAT CELCIUS
30 detik
Tidak
2
1 siklus
60 DERAJAT CELCIUS
5 mnt
Tidak
3
95 DERAJAT CELCIUS
1 mnt
Tidak
4
40 siklus
95 DERAJAT CELCIUS
10 detik
Tidak
5
60 DERAJAT CELCIUS
31 detik
Hasil tes Sampel Yesterterkait dengan sampel pengumpulan, pemrosesan, transportasi dan penyimpanan
kualitas;
Jika kontaminasi silang tidak dikontrol dengan baik selama ekstraksi sampel, hasil positif palsu
akan muncul;
Kebocoran produk kontrol positif dan amplifikasi akan menyebabkan hasil positif tidak benar;
Metode ekstraksi yang berbeda memiliki efisiensi ekstraksi yang berbeda, yang akan menghasilkan kesalahan
hasil negatif;
Transportasi reagen, penyimpanan yang tidak sesuai atau sadapan persiapan reagen yang tidak akurat ke penolakan tersebut
efisiensi deteksi reagen, yang mengakibatkan deteksi kuantitatif negatif atau tidak akurat
hasil;
Hasil pengujian hanya untuk referensi. Jika Anda perlu didiagnosis, silakan gabungkan
gejala klinis dan metode tes lainnya.
6. Standar kontrol kualitas
Bahan kontrol kualitas negatif: Tidak ada kurva amplifikasi nyata atau tampilan nilai CT;
Bahan kontrol kualitas positif: Kurva amplifikasi hanya memiliki amplifikasi indeks yang nyata
Bentuk-S, dan nilai CT ≤ 32;
Kondisi di atas harus terpenuhi pada saat yang sama, jika tidak eksperimen akan dilakukan
dianggap tidak valid.
7. Indeks kinerja produk
Tingkat kebetulan dari rujukan positif dan negatif: 5 referensi positif adalah 100%;
10 referensi negatif adalah 100%.
Batas deteksi minimum adalah 5 x 102 salinan/ml.
Presisi: Koefisien variasi (CV) nilai CT deteksi presisi dalam dan
di antara kumpulan adalah ≤ 3%.
Pemasok yang Diaudit 
